全基因敲除小鼠模型制备

根据客户的需求进行打靶载体构建，由客户提供目标基因的Ensembl序列号，并提出拟剔除区域；研究院科研人员设计打靶策略，并反馈客户，经客户确认后进行打靶载体的构建及后续研发。研究院承诺提供3只以上阳性小鼠。
技术指标：

显微注射用受精卵采自C57BL/ 6J（♀）与CBA（♂)的Fl代；胚胎移植(受精卵输卵筐移植)受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境；阳性小鼠需通过测序证实待敲基因的序列。

条件性基因敲除或敲入小鼠模型制备

根据客户的需求进行打靶载体构建，由客户提供目标基因的Ensembl序列号，并提出拟剔除(或敲入)区域；研究院科研人员根据客户的需求确定flox或敲入片段插入的区域，经认可后研究院科研人员设计打靶策略，并反馈客户，经害户确认后进行打靶载体的构建及后续研发。研究院承诺提供3只以上阳性小鼠。

技术指标：显微注射用受精卵采自C57BL/6J（♀）与CBA(♂)的Fl代 ；胚胎移植(受精卵输卵雷移植)受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境。对于基因敲入、flox小鼠各阶段均需通过测序证实敲入基因的存在和序列正确。

转基因小鼠制备

由客户提供转墓因质粒图谱、质粒DNA及真相关序列信息，研究院负责质粒鉴定、酶切线性化DNA制备、小鼠受精卵显微注射 、注射受精卵移植 、移植小鼠孕期观察饲养、新生小鼠出生记录及生命维持 、编号及鼠尾基因组DNA抽握、转基因阳性小鼠的PCR鉴定等。

技术指标：显微注射用受精卵采自C57BL/ 6J(♀)与CBA（♂)的Fl代；胚胎移植（受精卵输卵筐移植)受体采用ICR代假孕母鼠；受精卵供体、受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境；获得转基因质粒六个月内提供3只以上鼠龄4-6周的转基因阳性小鼠(杂合子Funder)，雌雄不限。

原核/胞质注射

原核/胞质注射可以用于对mRNA、普通小片段及大片段DNA、BAC(Bacterial Artificial Chromosome，细菌人工染色体)进行注射、以及相关DNA混合共注射。

囊胚注射

囊胚注射是用于对已打靶好的ES细胞进行囊胚注射，目的是为了得到嵌合率较高的小鼠，而且要求被注射进入的ES细胞能发育成生殖细胞。

由客户提供待注射物品，研究院负责小鼠胚胎的显微注射、胚胎移植、移植小鼠孕期观察饲养、嵌合体小鼠出生记录、生命维持等。

技术指标：显微注射用胚胎取自C57BL/6J或ICR(由客户选择)；胚胎移植(受精卵子宫内移植)受体采用ICR代假孕母鼠；胚胎供体受体及新生仔鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境。 

净化

外来的小鼠进入本中心前需进行隔离检疫，报告显示有污染的动物进入SPF级设施需要通过生物净化，以防止未知的微生物、病原体及小鼠传染病所带来的风险。

供鼠要求：

1. 健康雄鼠1-2只，3-6 月龄(超龄可以尝试)，品系背景明确。我们可提供提供野生型小鼠净化。

2. 健康雄鼠1-2只，3-6 月龄(超龄可以尝试)，同品系雌鼠4-8周龄，5只以上。

常用转基因及基因剔除小鼠目录