THP-1属于悬浮细胞,显微镜下可见细胞呈圆形,透明度高,背景干净,碎片很少,说明细胞状态很好。
2.THP-1常用RPMI 1640培养基,含10%胎牛血清,在37度、5% CO2培养箱中培养。特别注意的是THP-1喜欢酸性环境,对培养基pH值的变化很敏感,通常培养基颜色呈橘红色时细胞适宜生长。所以尽量使用相同Ph的1640。
3.THP-1细胞有密度依赖性,低密度时细胞生长慢,建议细胞量维持在每毫升50-100万为宜,超过10^6/ml即可传代,传代比例采用1:3~1:4,换液不需要太频繁,正常2~3天换1次液即可。
注意细胞的密度一定要高,介于5×105—— 106/ML之间,增值的快。细胞数量太少,不适合THP-1生长,一般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多,继续培养一天或者两天,培养基严重泛黄,细胞数会增加。这一点不同于同是单核细胞系的U937细胞。
4.传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增。
5.THP-1细胞培养时需要添加0.05mM的β-巯基乙醇。
6.THP-1细胞培养时可能会有部分细胞聚团生长,若细胞团块过大过多,应当轻轻将其吹散。
微生物检验报告如何正确解读?
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