如果THP-1细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
方法一
收集THP-1细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液
补加1-2ml培养液后吹匀,将THP-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含10ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二
可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起
将THP-1细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
备注:第一次传代时,若培养基中有细胞碎片,则将细胞悬液装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀,按1:1分到新的装有10mL新鲜培养基的培养皿中,置于培养箱中培养。
THP-1细胞冻存步骤
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面10cm皿为例;
1.收集THP-1细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,加 1 mL新鲜培养基重悬细胞,进行细胞计数。
2.根据THP-1细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3.将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
微生物检验报告如何正确解读?
微生物检验报告如何正确解读?