1.细胞复苏

　　将冻存管从液氮中取出后迅速放入37℃水浴锅中摇晃解冻，准备15ml离心管，将完全培养基移取6ml与细胞混合均匀，在1000RPM条件下离心3min，弃去上清液，再加入6ml完全培养基吹匀后重复离心3min，弃去上清液，补加6ml完全培养基吹匀。然后将细胞悬液加入T25培养瓶放入细胞培养箱（37℃，5%CO2）过夜，第二天检查细胞密度。

　　2.细胞传代

　　当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时，即可进行传代。由于是悬浮细胞，可直接将细胞吸出，离心之后传代。传代少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。如果用肉眼观察则将培养瓶平放静置后观察镜下细胞密度达到80%，即可进行传代。

　　3.细胞冻存

　　50%RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 配置细胞冻存液或使用Biochannel细胞冻存液（将培养瓶中细胞悬液抽出，在1000RPM条件下离心3min，弃去上清液。按照需求将配置好的细胞冻存液加入离心管中吹匀细胞，再分装冻存管中置于程序降温盒中在-80℃冰箱中过夜，次日放入液氮中保存。