注意事项:
1、在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年;
2、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10ul 0.1M的HCL溶液或者1%(w/v)SDS溶液,并遮盖培养板避光在4℃冰箱中保存,24小时内测定,吸光度不会发生变化;
3、如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基,去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可;
4、当在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,最外一圈的孔加培养基或者PBS,不作为测定孔用;
5、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定;
6、酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去;
7、CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果;
8、当终浓度为1 mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话,将会100%抑制。
微生物检验报告如何正确解读?
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